神經(jīng)干細(xì)胞基的使用注意事項

1.在配制*培養(yǎng)基前，請把間充質(zhì)干細(xì)胞無動物源生長添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素(P/S)放到2-8℃冰箱過夜解凍，然后加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。
 
2.在使用*培養(yǎng)基前，需要把培養(yǎng)基放到37℃恒溫水浴中預(yù)熱，注意溫度不要超過37℃。
 
3.請把配制好的*培養(yǎng)基放在4℃冰箱避光保存，并盡量在一個月內(nèi)使用完。若培養(yǎng)基要分幾次使用，請將間充質(zhì)干細(xì)胞無動物源生長添加劑(MSCGS-xf)、青霉素-鏈霉素 (P/S)解凍按用量分裝后保存。
 
4.可不包被培養(yǎng)瓶，但配合貼壁材料Attachin（貨號BW110028）使用效果更佳。
 

免疫細(xì)胞化學(xué)染色具體方法為：

（1） 0.05M PBS漂洗 10min×3次

（2） 0.3%H2O2/0.05M PBS室溫 30min

（3） 0.3%Triton-100/0.05M PBS 37 ℃，15min

（4） 0.05M PBS漂洗 10min×3次

（5） 5%羊血清/0.05M PBS 37 ℃，15min

（6） I抗（2%羊血清/0.05M PBS配） 4℃，48h

（7） 0.05M PBS漂洗 10min×3次

（8） II抗（2%羊血清/0.05M PBS配，1：200） 37 ℃，1.5h

（9） 0.05M PBS漂洗 10min×3次

（10） AB復(fù)合物（0.05M PBS配，1：100） 37 ℃，1.5h

（11） 0.05M PBS漂洗 10min×3次

（12） Tris-HCl緩沖液 37 ℃，15min

（13） DAB顯色 20min

（14） 蒸餾水漂洗 10min×3次